呼吸道(dào)感染性疾病在臨床中很常見,而冬春季節更是呼吸道(dào)感染的高發(fā)季節。呼吸道(dào)感染分爲上呼吸道(dào)感染和下呼吸道(dào)感染。2019 年世界衛生組織( World Health Organization,WHO) 公布的全球主要死亡原因中就(jiù)包括了呼吸道(dào)感染,下呼吸道(dào)感染仍然是世界上病死率最高的感染性疾病之一,排在主要死亡原因的第四位。兒童是呼吸道(dào)感染的易感人群,近期呼吸道(dào)感染病原體在兒童中排名前三位的爲流感、腺病毒、呼吸道(dào)合胞病毒,第四位爲肺炎支原體,呈現出多種(zhǒng)病原體共同流行的态勢。不同呼吸道(dào)病原體感染引起(qǐ)的臨床症狀、體征相似,因此,臨床醫師僅僅依靠臨床症狀、體征,很難對(duì)疾病作出準确的病原學(xué)診斷。在沒(méi)有明确的病原微生物學(xué)診斷的情況下,治療上容易出現廣譜抗菌藥物和糖皮質激素類藥物的濫用,或者延誤治療。病原體的快速檢測和精準診斷是其有效治療的前提。在多種(zhǒng)呼吸道(dào)病原體共同流行的高發(fā)季節,感染過(guò)一種(zhǒng)呼吸道(dào)傳染病的人還(hái)有可能(néng)感染其他種(zhǒng)類,出現混合感染、先後(hòu)感染。因此,一次對(duì)多種(zhǒng)病原體同時(shí)進(jìn)行檢測,可以極大地提升診斷效率,輔助臨床醫生進(jìn)行鑒别診斷以及識别混合感染的風險。傳統微生物學(xué)及免疫學(xué)技術對(duì)呼吸道(dào)病原體檢測的靈敏度偏低,而核酸檢測技術的發(fā)展和臨床應用大幅度提高了呼吸道(dào)病原體的診斷能(néng)力。多重核酸檢測方法可以在同一份标本中檢測出多種(zhǒng)病原體,提示存在混合感染的情況,通過(guò)病原體相對(duì)載量高低,可以判斷哪種(zhǒng)病原體是主要病原體。或者通過(guò)聯合不同檢測方法,确定緻病病原體。例如:1.呼吸道(dào)13種(zhǒng)病原體多重檢測方法:是用PCR毛細電泳片段分析法,可在一份标本中檢測的病原體包括:甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1(2009)、季節性H3N2病毒、乙型流感病毒、偏肺病毒、腺病毒、博卡病毒、肺炎支原體、鼻病毒、冠狀病毒、副流感病毒、呼吸道(dào)合胞病毒、衣原體。标本:①痰液:深部咳痰,≥1mL;②咽拭子:一次性植絨拭子采集,裝入3ml細胞保存液。2. 六項呼吸道(dào)病原菌核酸檢測項目:是利用熒光PCR檢測方法,可以同時(shí)檢測六種(zhǒng)呼吸道(dào)病原菌,包括:肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、軍團菌。标本:痰液,肺泡灌洗液,胸腔積液。3.肺炎支原體核酸檢測:是利用熒光PCR檢測方法檢測肺炎支原體DNA或RNA。标本:咽拭子,痰液,肺泡灌洗液,胸腔積液。肺炎支原體核酸檢測非常靈敏,且特異性高,發(fā)病初期,選擇核酸檢測;肺炎支原體抗體IgM一般在感染後(hòu)4~6天才能(néng)産生,3周左右達到高峰,持續存在2~4個月甚至更長(cháng)時(shí)間,所以發(fā)病初期可能(néng)檢測不到,發(fā)病一周以上,可以選擇抗體檢測,或者兩(liǎng)種(zhǒng)結合檢測。4.mNGS應用高通量測序:無偏倚性提取标本中全部的核酸,通過(guò)生物信息分析,獲得疑似緻病微生物的種(zhǒng)屬信息。具有準确性和可靠性高、 可提供大量的生物信息、對(duì)未知病原确認快、周轉時(shí)間短等優點。因而在急危重症、疑難及混合感染診斷方面(miàn)具有明顯的優勢。但因成(chéng)本高,不推薦作爲輕症感染性疾病的一線檢測。通過(guò)病史、臨床表現,選擇合适的病原體檢測方法,結合血常規等常規檢驗項目及影像學(xué)檢查等方法,臨床醫生可以根據不同病原體選擇合适的抗菌藥物或抗病毒藥物,減少廣譜抗菌藥物的濫用,促進(jìn)疾病的恢複,減輕病人的經(jīng)濟負擔。
參考文獻:
[1]王紫荊,方劍,胡小林等.兒童非典型病原體肺炎病原及流行病學(xué)特征分析[J].實用醫院臨床雜志,2020,17(06):156-158.
[2]中華檢驗醫學(xué)培訓工程專家委員會(huì),中華醫學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì).成(chéng)人呼吸道(dào)感染病原診斷核酸檢測技術臨床應用專家共識(2023)[J].協和醫學(xué)雜志,2023,14(05):959-971.
[3]陳舒影,餘方友.呼吸道(dào)感染病原體檢測技術與發(fā)展趨勢[J].中國(guó)臨床新醫學(xué),2022,15(10):894-899.
[4]劉靜,闫莉莉,趙淑賢等.宏基因二代測序在肺部感染病原菌檢測的應用[J].安徽醫科大學(xué)學(xué)報,2023,58(06):1046-1050.DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.06.029.